人酯酶D(EsD)試劑盒是一種基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)的檢測工具，廣泛應(yīng)用于科研和臨床領(lǐng)域中。
1.雙抗體夾心法：采用雙抗體夾心法進(jìn)行測定。預(yù)先用純化的人酯酶D抗體包被微孔板，形成固相抗體層。當(dāng)加入待測樣本后，樣本中的酯酶D會與固相上的抗體特異性結(jié)合。隨后加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，進(jìn)一步與已結(jié)合的抗原形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物；
2.洗滌步驟：通過多步洗滌去除未結(jié)合的成分，減少背景干擾；
3.顯色反應(yīng)：加入底物TMB后，在HRP酶的催化作用下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，再經(jīng)酸性環(huán)境作用變?yōu)辄S色。顏色的深淺與樣品中EsD濃度呈正相關(guān)，可通過分光光度計(jì)定量分析。
人酯酶D(EsD)試劑盒的使用注意事項(xiàng)：
1.安全性操作
-避免接觸有害試劑：終止液和底物A/B具有潛在危險(xiǎn)性，若不慎接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗；禁止用嘴吸取任何試劑，實(shí)驗(yàn)過程中勿飲食、吸煙或化妝。
-個(gè)人防護(hù)裝備：建議佩戴手套、護(hù)目鏡和實(shí)驗(yàn)室外套，防止生物污染。
2.樣本與試劑管理
-禁用含NaN的樣品：疊氮鈉會抑制HRP活性，影響顯色反應(yīng)，此類樣本不得用于檢測；
-溶血標(biāo)本慎用：溶血可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果，需提前評估樣本質(zhì)量；
-保存條件合規(guī)性：試劑盒應(yīng)冷藏保存(2-8℃)，并在有效期內(nèi)使用；已開啟的試劑需及時(shí)密封并盡快用完。
3.實(shí)驗(yàn)優(yōu)化細(xì)節(jié)
-準(zhǔn)確計(jì)時(shí)控溫：溫育步驟的時(shí)間和溫度必須嚴(yán)格遵守說明書要求，以保證抗原抗體充分結(jié)合；
-避免交叉污染：移液器、槍頭等工具專用化，防止不同樣本間的交叉污染；
-預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：初次使用時(shí)可通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)最佳取樣量及稀釋比例，尤其針對高濃度樣本。
4.應(yīng)用限制說明
-科研用途限定：該試劑盒僅適用于科學(xué)研究，不可用于臨床診斷；
-種屬特異性匹配：雖然部分產(chǎn)品標(biāo)注多物種適用(如人、鼠等)，但需確保檢測目標(biāo)與試劑盒設(shè)計(jì)一致，避免跨物種交叉反應(yīng)導(dǎo)致的誤差。
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更新時(shí)間：2025-11-13 
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